Elisa試劑盒檢測原理

Elisa生物檢測是一種敏感度高，同時(shí)特異性強，重復性好的實(shí)驗檢測方法，由于其試劑穩定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結果判斷較客觀(guān)等因素，已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。

目前市面上的Elisa試劑盒檢測原理主要有以下四種：直接法，間接法，夾心法，競爭法。

Elisa試劑盒評價(jià)標準：

① 準確性：標準品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數R值，應大于等于0.9900。

② 靈敏度：反應試劑盒的檢測濃度最小值

③ 特異性：不與其它可溶性結構類(lèi)似物交叉反應。

④ 重復性：板內、板間變異系數

⑤ 回收率：判斷實(shí)驗的準確性和特異性

Elisa試劑盒的標準曲線(xiàn)：

標曲R值是幾個(gè)9才合格？

實(shí)驗室應按檢測標準（方法）的要求使用標準溶液或標準物質(zhì)建立標準曲線(xiàn)。所用標準溶液或標準物質(zhì)應覆蓋被測樣品的濃度范圍。檢測標準（方法）如無(wú)具體的要求，至少使用5個(gè)標樣（除空白外）建立線(xiàn)性標準曲線(xiàn)，每個(gè)點(diǎn)重復測定1-3次，對于篩選方法，線(xiàn)性回歸方程的相關(guān)系數不應低于0.98，對于確證方法，相關(guān)系數不應低于0.99。

其實(shí)，大于0.99是判斷是否為線(xiàn)性相關(guān)的一個(gè)標準，實(shí)際應用中線(xiàn)性大于0.999才是比較理想的。線(xiàn)性在0.99到0.999之間的監測結果只用接近最高濃度一半（中間濃度）的位置才比較準確，如果線(xiàn)性大于0.999的話(huà)，在整個(gè)線(xiàn)性范圍內都會(huì )有一個(gè)比較滿(mǎn)意的結果。

如果檢測的線(xiàn)性不好，可以減少標準的覆蓋范圍，將標準的濃度調整到待測樣品濃度附近，這樣結果也是非常準確的。例如，樣品的濃度約20ppb,但在0~50ppb范圍建立標準曲線(xiàn)，但線(xiàn)性非常不理想，這時(shí)可以將標準范圍調整到15~25ppb之間，作五個(gè)標準。

可以檢測檢測各類(lèi)食品，飼料，組織及生物液體中真菌毒素、抗生素、食品添加劑以及其他細菌蛋白的ELISA試劑盒：

1.抗生素類(lèi)：氨芐青霉素，貨號：E4350，樣本：血清，尿液，牛奶，組織

檢測食品中抗生素的殘留

樣本類(lèi)型：組織、血清、牛奶、雞蛋和其他生物樣本

真菌毒素是真菌產(chǎn)生的低分子量次級代謝產(chǎn)物

2.真菌毒素：總黃曲霉毒素，貨號：E4747，樣本：酒、醬油、醋、谷物、花生、配方飼料、食用油

樣品類(lèi)型：玉米、谷物、花生、大米、大豆等。

食品受到生物和環(huán)境污染物的污染發(fā)生在生產(chǎn)和加工的幾個(gè)階段

3.食品添加劑： 沙丁胺醇，貨號：K4209，樣本：豬尿、組織、飼料

樣品類(lèi)型：牛奶、肉類(lèi)、玉米、谷物、花生、大米、大豆，等。

表達蛋白經(jīng)過(guò)幾個(gè)純化步驟后，宿主細胞蛋白仍然可以以較高濃度存在，甚至會(huì )與原料藥一起純化和濃縮；樣品類(lèi)型：細胞裂解液、其他生物液

4.宿主細胞蛋白：CHO 宿主細胞蛋白，貨號：E4537，樣本：細胞裂解液，其他生物液體

5.其他毒素：雙酚A（BPA），E4722，樣本：細胞裂解液，其他生物液體