CANDOR Bioscience優(yōu)質(zhì)ELISA產(chǎn)品在實(shí)驗中的應用

一提到ELISA，各位做科研的小伙伴都很熟悉，不就是簡(jiǎn)單的抗原抗體反應嘛？但這“簡(jiǎn)單的免疫反應"，往往在實(shí)際操作中一個(gè)不小心，結果就會(huì )相差甚遠，甚至功虧一簣，假陽(yáng)性或者假陰性會(huì )讓人焦頭爛額，那么，到底要怎樣快速有效的得到可靠的ELISA結果呢？

今天小編給大家帶來(lái)的是一家位于德國的專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)免疫優(yōu)化試劑的公司-——candor bioscience，它專(zhuān)注于ELISA各個(gè)環(huán)節中的試劑，為廣大研究者提供超過(guò)50種不同類(lèi)型的產(chǎn)品，包括優(yōu)化試劑，封閉試劑，穩定劑和免疫實(shí)驗緩沖液。通過(guò)使用這些試劑，可以幫助您提高實(shí)驗結果的可靠性，簡(jiǎn)化實(shí)驗步驟，減少實(shí)驗時(shí)間。

接下來(lái)，小編將通過(guò)Sandwich-ELISA的實(shí)驗過(guò)程像大家展示candor bioscience優(yōu)質(zhì)ELISA產(chǎn)品在實(shí)驗中的應用。

第一步，抗體的包被：

用Coating Buffer 1x（貨號120/121）將抗體稀釋至0.1 - 10 µg/mL。在酶標板反應孔中加100-150 µL包被好的抗體，4℃孵育過(guò)夜或室溫孵育1-4 h。次日，棄去孔內溶液，用Washing Buffer 1x （Washing Buffer 10x TRIS, 貨號145）洗板3 -5次，每次3 min。

第二步，封閉與穩定：

用表面封閉劑來(lái)充填空隙，從而排除ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。推薦使用的表面封閉劑如The Blocking Solution（貨號110），SmartBlock™（貨號113），BSA-Block（貨號115）。每個(gè)空中加入200 µl的表面封閉劑，室溫孵育1-2 h后，棄去孔內溶液，用Washing Buffer 1x （Washing Buffer 10x TRIS, 貨號145）洗板3 -5次，每次3 min。

如果想保持ELISA板包被狀態(tài)的長(cháng)期穩定，這個(gè)步驟就是必選的?？梢赃x用Liquid Plate Sealer®（貨號160）進(jìn)行ELISA板的穩定，向每個(gè)孔中加入200 µl的Liquid Plate Sealer®，室溫孵育15-90 min，棄去孔內溶液，在37-45 ℃條件下干燥1-2 h，這樣處理后的板子放在密封袋中，在干燥、2-8 ℃的環(huán)境中保存1-3 年的時(shí)間。

第三步，添加樣品或校準液(雙重測量)：

在孔中加入100-150 µL用樣品稀釋液稀釋后的樣品以及標準液，室溫孵育30 min，棄去孔內溶液，用Washing Buffer 1x （Washing Buffer 10x TRIS, 貨號145）洗板3 -5次，每次3 min。

推薦使用candor bioscience優(yōu)質(zhì)buffer：

1. LowCross-Buffer®（貨號100），有助于減少交叉反應、基質(zhì)效應和非特異性結合等干擾。將干擾降到zui低，提升了分析的質(zhì)量與結果的可靠性。

2. Sample Buffer（貨號105），適合在無(wú)干擾的情況下使用。

3. Antibody Stabilizer（貨號130/131），可以在2-8°C下長(cháng)期儲存蛋白質(zhì)或抗體的穩定劑

第四步，加入標記抗體并檢測：

向每個(gè)孔中加入100-150 µl的標記抗體(HRP，辣根過(guò)氧化物酶;AP、堿性磷酸酶等)，室溫孵育2-4 h，棄去孔內溶液，用Washing Buffer 1x （Washing Buffer 10x TRIS, 貨號145）洗板3 -5次，每次3 min，進(jìn)行底物檢測(如過(guò)氧化物酶的TMB)。

推薦使用candor bioscience優(yōu)質(zhì)buffer：

1.HRP-Protector™（貨號222）, 用于在2-8℃長(cháng)期保存HRP-結合物。

2. AP-Protector®（貨號235），用于2-8℃長(cháng)期保存AP-結合物，還可直接用于AP偶聯(lián)物的培養。

3. LowCross® HRP-Stab（貨號270），用于在2-8℃長(cháng)期保存HRP結合物，可以最大限度地減少非特異性結合、交叉反應和基質(zhì)效應，中和干擾（包括 HAMA 的衍生干擾）。

4. LowCross-Buffer®（貨號100），有助于減少交叉反應、基質(zhì)效應和非特異性結合等干擾。將干擾降到zui低，提升了分析的質(zhì)量與結果的可靠性。

5. Sample Buffer（貨號105），適合在無(wú)干擾的情況下使用。

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