如何選擇熒光定量PCR中的對照？

對照的目的是對檢測的各個(gè)環(huán)節進(jìn)行監控，因此我們按照檢測的流程對對照進(jìn)行梳理。那么我們應該如何選擇熒光定量PCR中的對照呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、陽(yáng)性對照和陰性對照

陽(yáng)性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進(jìn)行了提取和擴增最終獲得了陽(yáng)性結果和陰性結果。陰陽(yáng)性對照強調處理過(guò)程與樣品一致，并且有明確的預期結果。

二、擴增對照

我們通常說(shuō)的陽(yáng)性對照和陰性對照指的是擴增試劑盒中附帶的不需要提取的陽(yáng)性對照和陰性對照，更準確的定義應該是擴增陽(yáng)性對照和擴增陰性對照。擴增陽(yáng)性對照含有陽(yáng)性擴增模板，擴增陰性對照應含有陰性擴增模板（基質(zhì)核酸）。擴增對照只能監控每次擴增過(guò)程中的擴增系統是否正常，不能監控采樣、提取和每份樣品的操作過(guò)程。如果是檢測RNA樣品的檢測試劑盒，其擴增陽(yáng)性對照使用質(zhì)粒，便無(wú)法監控反轉錄過(guò)程。

三、內標（Internal Control，IC）

內標是指在同一反應管中與靶序列共同擴增的一段非靶序列分子。內標有兩種形式，一種是使用天然樣品中含有的內參基因作為內標，另一種是人工添加的內標。內標的最大特點(diǎn)是與靶序列共同擴增，而其他的對照都是獨立擴增。

四、核酸提取對照

可以使用內參基因，假病毒混合基質(zhì)，滅活病毒混合基質(zhì)來(lái)監控提取到擴增的流程。

五、反轉錄對照（RT control）

可以使用提取好的RNA內參基因，RNA假病毒混合基質(zhì)，滅活RNA病毒混合基質(zhì)來(lái)監控反轉錄到擴增的流程。

無(wú)反轉錄對照（no-RT control）含有除反轉錄酶以外的所有成分。

更多有關(guān)如何選擇熒光定量PCR對照的問(wèn)題，請聯(lián)系北京百奧創(chuàng )新科技有限公司：