如何檢測細胞凋零？

細胞凋亡是程序性細胞死亡的高度調控形式，在多細胞生物發(fā)育過(guò)程中、整個(gè)生命周期以及對細胞應激作出反應時(shí)均可發(fā)生細胞凋亡。核固縮、細胞皺縮、質(zhì)膜出泡和 DNA 斷裂是細胞凋亡的典型特征。那么你知道如何檢測細胞凋零嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、對細胞懸浮液進(jìn)行 Annexin V 染色后，通過(guò)流式細胞儀可以有效地識別細胞凋亡早期脂質(zhì)雙層的變化。但是，這種檢測不太適合完整的組織標本，否則結果難以量化和解釋。

二、其他細胞凋亡標記，如 Cleaved Caspase-3 和核酶多聚二磷酸腺苷核糖 (ADP-ribose) 聚合酶 (PARP)，更適合用傳統的免疫組織化學(xué)方法在組織切片中檢測。

三、使用 DNA 染料染色（例如 DAPI 和 Hoeschst 33342）來(lái)觀(guān)察染色質(zhì)凝聚。

四、使用末端脫氧核苷酸轉移酶介導 dUTP 缺口末端標記法 (TUNEL) 檢測以及其他亞細胞定位標記（包括 細胞色素 C 從線(xiàn)粒體到細胞質(zhì)的轉位）確定 DNA 鏈斷裂和碎片裂解。

五、線(xiàn)粒體膜電位是細胞健康狀態(tài)的關(guān)鍵指標，其損耗與非活性、功能失調的線(xiàn)粒體，因此，它是細胞凋亡的早期指標，可以在與細胞可滲透陽(yáng)離子染料 TMRE（四甲基羅丹明乙酯）孵育后進(jìn)行檢測。TMRE 通常在健康完整線(xiàn)粒體中累積，因此，當線(xiàn)粒體膜電位被破壞時(shí)，熒光強度降低。

六、生長(cháng)因子和細胞因子通過(guò)PI3K/Akt 途徑誘導的信號轉導會(huì )導致促凋亡的 Bcl-2 家族成員 Bad、Bax、caspase-9、GSK-3 和 FoxO1 的磷酸化和抑制，以及抗細胞凋亡蛋白如 Bcl-2 的上調。

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