原代培養和傳代培養主要區別是什么？

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一、原代培養

原代培養即第一次培養，是指將培養物放置在體外生長(cháng)環(huán)境中持續培養，中途不分割培養物的培養過(guò)程。有幾方面含義：

1.養物一經(jīng)接種到培養器皿（瓶）中就不再分割，任其生長(cháng)繁殖；

2.原代培養中的“代"并非細胞的“代"數，因為培養過(guò)程中細胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細胞；

3.原代培養過(guò)程中不分割培養物不等于不更換培養液，也不等于不更換培養器皿。

正常細胞培養的世代數有限，只有癌細胞和發(fā)生轉化的細胞才能無(wú)限生長(cháng)下去。所謂轉化即是指正常細胞在某種因子的作用下發(fā)生突變而具有癌性的細胞。世界上許多實(shí)驗室所廣泛傳用的HeLa細胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細胞培養而成。此細胞系一直延用至今。原代培養是建立各種細胞系（株）必經(jīng)的階段，其是否成功與組織污染與否、供體年齡、培養技術(shù)和方法、適宜培養基的選擇等多種因素有關(guān)。由于原代培養的細胞轉化性極小，對病毒敏感性好，因此適應制備疫苗等生物制品；但也存在有潛在外源因子、不能事先檢查標本、且受供體年齡健康狀況的影響而導致批間差異大等缺陷。常用的原代細胞培養有雞胚成纖維細胞及豬腎、猴腎、地鼠腎等原代細胞。

原代培養的基本過(guò)程包括取材、培養材料的制備、接種、加培養液、置培養條件下培養等步驟，在所有的操作過(guò)程中，都必須保持培養物及生長(cháng)環(huán)境的無(wú)菌。

多數情況下，分散的細胞若屬于貼壁依賴(lài)型細胞，就能黏附、鋪展于培養器皿和載體表面生長(cháng)而形成細胞單層，這種培養方式稱(chēng)為單層細胞培養（monolayerculture），又叫貼壁培養（adherentculture）。少數情況下，培養的細胞沒(méi)有貼壁依賴(lài)性，可通過(guò)專(zhuān)門(mén)設備使細胞始終處于懸狀態(tài)而在體外生長(cháng)，這種形式稱(chēng)為懸浮培養（suspensionculture）。如何讓接種的細胞盡快貼壁，是決定培養成功的關(guān)鍵步驟：

1.取決于適當的生長(cháng)基質(zhì)表面；

2.可降低接種后培養液對細胞的浮力，如先少補加少量培養液，待細胞貼壁后再補足營(yíng)養液繼續培養；

3.注意適當的細胞接種密度，一般105個(gè)/ml左右。

體外培養技術(shù)中所謂的傳“代"概念并不等于細胞生物學(xué)中“親代細胞"與“子代細胞"中“代"的概念。傳代培養的實(shí)質(zhì)就是分割后再一次培養，可以相對地衡量培養物的培養年齡。

二、傳代培養

傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學(xué)實(shí)驗的基礎。當細胞在培養瓶中長(cháng)滿(mǎn)后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長(cháng)。這一過(guò)程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實(shí)驗所需。傳代要在嚴格的無(wú)菌條件下進(jìn)行，每一步都需要認真仔細的無(wú)菌操作。

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