原代細胞取材的注意事項有哪些？

取材作為原代細胞培養過(guò)程中至關(guān)重要的一步，那么原代細胞取材的注意事項有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、皮膚和粘膜

主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。

二、內臟和實(shí)體瘤

1.無(wú)菌環(huán)境；

2.熟悉所需組織的類(lèi)型和部位；

3.要避開(kāi)破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結締組織。

三、血液細胞

一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結等)分離細胞，取材時(shí)應注意抗凝。

四、骨髓、羊水、胸/腹水細胞

嚴格無(wú)菌，注意抗凝，還要盡快分離培養，離心后，用無(wú)鈣、鎂PBS洗兩次，再用培養液洗一次后即可培養，不宜低溫存放。

五、動(dòng)物組織取材——鼠胚組織

1.用引頸或氣管窒息致死法處死孕期合適的動(dòng)物；

2.將其浸泡在含有75%酒精的燒杯中，5分鐘后取出動(dòng)物；

3.在消毒過(guò)的木板上可用無(wú)菌的圖釘或大頭針固定四肢，切開(kāi)皮膚；

4.用無(wú)菌操作法解剖取胚。

六、動(dòng)物組織取材——幼鼠胚腎(或肺)

幼鼠采用上述方法處死消毒后→腹部朝上固定在木板上，先切開(kāi)游離毛皮并拉開(kāi)至兩側→采用無(wú)菌法打開(kāi)胸腔取肺，或從背部打開(kāi)腹腔取腎。

七、雞(鴨)鳥(niǎo)類(lèi)胚胎組織

1.取孵化至適當胚齡(9~12天)的胚蛋，用照蛋燈在暗處燈檢，若有豐富血管、胚體有運動(dòng)的胚蛋，說(shuō)明胚體發(fā)育良好，并用有色筆劃出氣室和胚體位置；

2.將胚蛋置于蛋架上，先用溫水清洗蛋殼，再用75%酒精棉球擦干;

經(jīng)碘酒、75%酒精消毒后，在無(wú)菌條件下采用無(wú)菌法用剪刀或鑷子打開(kāi)氣室，沿氣室邊緣去除蛋殼;

3.用眼科鑷撕去殼膜，暴露出雞胚;

4.用彎頭鑷輕挑起胚頭，取出胚胎，放入無(wú)菌平皿中，解剖取材。

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