什么是文庫構建？

基于NGS測序的諸多優(yōu)點(diǎn)，故此技術(shù)在全球測序市場(chǎng)上占有著(zhù)絕對的優(yōu)勢位置，而新一代測序（NGS）文庫制備是一體化測序流程中的一個(gè)關(guān)鍵因素，那么什么是文庫構建呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

基因文庫是儲存了某種生物的DNA片段的受體菌的集合體。文庫分為儲存全部DNA片段和部分DNA片段，前者叫基因組文庫，后者包括cDNA文庫。

文庫構建的基礎是將目標RNA或DNA制備成可以和測序儀器兼容的形式。從組織或者細胞中將DNA或RNA提取出來(lái)，并通過(guò)機械破碎或者是酶切法對其進(jìn)行片段化。如果前面提取的是RNA樣本，則需要將RNA逆轉錄為cDNA。對DNA進(jìn)行接頭的連接后，一般還會(huì )有一個(gè)文庫的擴增，即通過(guò)PCR來(lái)對所需的目的片段進(jìn)行擴增，然后進(jìn)行上機測序。

傳統的DNA文庫構建包括：DNA片段化（超聲法）、末端修復、加A、接頭連接和PCR文庫擴增等過(guò)程（Figure 1）。整個(gè)實(shí)驗對DNA起始量、儀器有一定的要求。

新型的文庫構建方法利用轉座酶的轉座原理，對DNA進(jìn)行片段化并同時(shí)加上部分接頭序列，是建庫過(guò)程中是一個(gè)重大的進(jìn)步。

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