細胞培養過(guò)程中,培養基的顏色變化往往對應著(zhù)細胞狀態(tài),那么你知道DMEM培養基為什么是紅色的嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
在細胞生長(cháng)過(guò)程中,由于細胞釋放的代謝物改變了pH值,培養基的顏色也隨之改變。大多數情況下,DMEM培養基都呈紅色,這是因為DMEM細胞培養基的PH值大多在7.4左右。不同成分培養基的顏色會(huì )有差異,DMEM培養基會(huì )比1640顏色深一點(diǎn),主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導致。在較低的pH值下,酚紅會(huì )變成中黃色,而在較高的pH值下,它會(huì )變成中紫色。對于大多數培養體系(pH為7.2 ~ 7.4),培養基應為鮮紅色。
很多時(shí)候,DMEM培養基顏色并不是我們所見(jiàn)的紅色,而是偏紫或偏黃,不同顏色培養基究竟對應何種細胞狀態(tài)呢?
一、培養基顏色偏紅或者紫
開(kāi)封了一段時(shí)間后的DMEM培養基,顏色會(huì )比正常深很多。主要是因為DMEM培養基所用的緩沖體系為NaHCO3,培養基開(kāi)封后NaHCO3會(huì )分解成CO2溢出,導致培養基偏堿;可以將培養瓶擰松放置于CO2培養箱中一段時(shí)間后,培養基顏色會(huì )變正常。
二、顏色變深的DMEM培養基能不能繼續使用?
部分細胞能夠很快適應培養基的這種PH值波動(dòng),放入培養箱后可以正常生長(cháng);也有極少數的細胞會(huì )比較敏感,造成細胞漂浮過(guò)多等情況,如BV2細胞會(huì )就比較敏感,可能出現漂浮增多的情況。
三、培養基顏色變黃
通常DMEM培養基里的酚紅指示劑遇酸會(huì )變黃,但也有可能是細胞被污染而導致的DMEM培養基顏色變黃,以下為幾種常見(jiàn)情況:
1. 由于細胞代謝產(chǎn)酸,培養了細胞后的培養基會(huì )從紅變黃,如果培養基是橘黃色,則是細胞健康生長(cháng)的顏色,無(wú)須擔心,繼續培養即可。
2. 若細胞狀態(tài)良好,但換液后培養基顏色變黃快,則可能是因為細胞密度大或消耗過(guò)大,提示需要傳代了。
3. 若細胞狀態(tài)差,生長(cháng)異常,培養基很快變黃,變渾濁,鏡下觀(guān)察有較多小顆粒物,則有可能是細菌污染或支原體污染。輕度污染可用抗生素清洗處理或使用支原體清除試劑,重度污染建議消殺后丟棄。
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