RPMI 1640培養基最初是為淋巴細胞培養專(zhuān)門(mén)設計的,現被發(fā)現適用于多種哺乳動(dòng)物細胞,包括 HeLa 細胞、Jurkat 細胞、 MCF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星形膠質(zhì)細胞和癌細胞等。那么你知道該如何配置1640培養基嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、材料
1. 1640培養基粉末
2. 純水
3. 無(wú)菌量筒或燒杯
4. pH試紙或pH計
5. 無(wú)菌培養瓶或離心管
6. 無(wú)菌濾器
二、步驟
1. 準備工作區域:確保實(shí)驗室臺面清潔,并使用消毒劑將臺面消毒。
2. 洗手:che底洗手,并戴上實(shí)驗手套。
3. 準備無(wú)菌器具:將無(wú)菌培養瓶或離心管、無(wú)菌濾器放入高壓滅菌器中,按照廠(chǎng)商說(shuō)明進(jìn)行高壓滅菌。
4. 準備1640培養基:根據需求量,稱(chēng)取適量的1640培養基粉末,放入無(wú)菌量筒或燒杯中。
5. 加入純水:使用純水,緩慢加入1640培養基粉末中,同時(shí)攪拌,直到溶解wan全,形成均勻的液體。
6. 調節pH值:使用pH試紙或pH計,檢測培養基的pH值。如果需要調節pH值,可以加入少量的NaHCO3或NaOH(用于提高pH)或HCl(用于降低pH),并逐漸調節至目標pH值。
7. 過(guò)濾培養基:將調節好pH值的培養基通過(guò)無(wú)菌濾器過(guò)濾,以去除其中的微生物和雜質(zhì)。
8. 分裝培養基:將過(guò)濾好的培養基分裝到已經(jīng)高壓滅菌的無(wú)菌培養瓶或離心管中,每個(gè)容器裝滿(mǎn)后緊密封閉。
9. 高壓滅菌:將分裝好的培養基放入高壓滅菌器中,按照廠(chǎng)商說(shuō)明進(jìn)行高壓滅菌,以確保培養基的無(wú)菌性。
10. 存儲:將高壓滅菌后的培養基存放在冰箱中,以防止其變質(zhì)。
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