Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)培養基作為細胞培養領(lǐng)域的重要組成部分,其配方的設計直接關(guān)系到細胞在體外環(huán)境中的生長(cháng)和繁衍。本文將剖析DMEM培養基的配方,逐一解讀其中每一成分的作用,為科研人員提供詳實(shí)的培養基配方指南。
DMEM培養基配方成分詳解:
★基礎培養基:
DMEM(Dulbecco改良的Eagle培養基)是一種廣泛使用的基礎培養基,可用于支持多種不同的哺乳動(dòng)物細胞生長(cháng)。原始的DMEM培養基配方中葡萄糖濃度為(1 g/L),DMEM高糖培養基包含4500 mg/L的D-葡萄糖,其提供了培養基的基礎結構,是營(yíng)養的主要來(lái)源。
★緩沖劑:
碳酸氫鈉緩沖系統(3.7 g/L),其使得DMEM高糖培養基能夠5–10% CO2的環(huán)境來(lái)維持生理pH值。
Hepes緩沖液:調節培養基的pH值,確保適宜的酸堿平衡。
★氨基酸和維生素:
L-谷氨酰胺是細胞生長(cháng)的必須氨基酸,為培養的細胞提供重要的能量來(lái)源,能促進(jìn)細胞生長(cháng),有助于細胞存活;
L-胱胺酸(Cystine)為蛋白質(zhì)和氨基酸代謝提供基礎。
L-蛋氨酸是轉甲基化和轉硫的前體。
維生素B群、維生素C和維生素E可滿(mǎn)足細胞對維生素的需求。
抗生素(通常為青霉素和鏈霉素)可預防微生物污染。
★生長(cháng)因子(可選):
表皮生長(cháng)因子(EGF)和胰島素樣生長(cháng)因子(IGF):可根據需要添加,促進(jìn)特定細胞類(lèi)型的增殖。
如果需要,可以在DMEM中添加生長(cháng)因子。但是添加的生長(cháng)因子類(lèi)型和數量應根據特定的細胞類(lèi)型和實(shí)驗需求來(lái)確定。是否在DMEM中添加生長(cháng)因子,以及添加哪種生長(cháng)因子,取決于實(shí)驗的具體需求和實(shí)驗目標。
以上僅列出DMEM培養基部分配方成分,對不同細胞培養,可以根據細胞特性自行調整DMEM培養基配方。通過(guò)深入理解DMEM培養基的配方,科研人員可以更好地根據實(shí)驗需求進(jìn)行調整,為細胞提供精準、有針對性的培養環(huán)境。中科百抗的DMEM培養基包含4.5 g/L葡萄糖、酚紅、L-谷氨酰胺和110 mg/L丙酮酸銨,以磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)作為緩沖液,不含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長(cháng)因子的配方,因此在使用時(shí)需要額外補充10%的胎牛血清(FBS),以確保細胞得到充足的營(yíng)養和生長(cháng)所需的支持。
微信掃一掃