Elabscience生物素標記試劑盒有哪些常見(jiàn)問(wèn)題？如何解決？

Elabscience生物素標記試劑盒提供了標記所需的全部試劑，能簡(jiǎn)單有效地對含有伯氨基（-NH2）分子的蛋白標記。那么你知道Elabscience生物素標記試劑盒有哪些常見(jiàn)問(wèn)題嗎？該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、蛋白上wan全沒(méi)有標記上生物素

1. 不恰當的操作，如生物素和蛋白未wan全混勻，蛋白中的含有過(guò)量的銨離子或者氨基成分，或者其他誤操作。解決方法：設置陽(yáng)性對照。

2. 生物素保存不當。解決方法：未標記之前，生物素中不可混入水分，取生物素時(shí)，平衡至室溫約 5~10 min 后再開(kāi)封。

3. 超濾管使用不當。解決方法：超濾完后，濾芯中液體較少，不要使用移液器直接吸取超濾管芯中的樣品，應倒置后離心出樣品。

4. 因離心機的差異，超濾時(shí)轉速過(guò)高。解決方法：離心機轉速為12000×g，非 12000rpm。

5. 超濾管漏液。解決方法：超濾管芯不要裝過(guò)多液體導致溢漏。

二、較低的蛋白回收率

1. 標記過(guò)程中蛋白發(fā)生聚集沉淀。解決方法：添加 1M Tris 及時(shí)終止反應。

2. 超濾濃縮時(shí)蛋白濃度過(guò)大。解決方法：一支超濾管芯不要裝入過(guò)多的蛋白，如 1 mg以上的蛋白。

3. 蛋白在標記緩沖液中溶解度不高。解決方法：換用其他標記蛋白試劑盒。

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