Elabscience MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性檢測。那么你知道Elabscience MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒該怎么用嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
1. 準備工作
本試劑盒中 MTT (5×)為濃縮液,實(shí)驗前稀釋成 1×工作液。例如:取 100 μL MTT (5×),加入 400 μL
MTT Diluent Buffer,混勻后即為1×MTT 工作液。
2. 取生長(cháng)狀態(tài)良好的細胞,調整細胞密度,按每孔100 μL 細胞懸液接種于96 孔板中,同時(shí)設空白孔(不加細胞但是加入同體積的培養基)。
注:通常細胞增殖實(shí)驗每孔加入100 μL約含2000個(gè)細胞,細胞毒性實(shí)驗每孔加入100 μL約含5000個(gè)細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。
3. 根據實(shí)驗設計對細胞進(jìn)行培養和處理。
4. 每孔加入 50 μL 的 1×MTT 工作液。繼續孵育 1~4 h,使 MTT 還原為甲臜。
注:MTT孵育條件與細胞培養條件相同。
5. 小心吸出上清液,每孔加入 150 μL 的 DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
6. 用酶標儀測定在 570 nm 處的吸光度。
7. 結果計算
[注]:
ODsample: 實(shí)驗孔的OD值
ODcontrol: 對照孔的OD值
ODblank: 空白孔的OD值
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