PCR是聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction）的簡(jiǎn)稱(chēng)，是一種體外擴增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，PCR技術(shù)有很多，那么我們該如何區分各種PCR技術(shù)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！
實(shí)時(shí)熒光定量PCR，也叫Real-Time PCR，即二代PCR，是指在PCR擴增反應體系中加入熒光染料或者熒光基團，在整個(gè)PCR過(guò)程中通過(guò)收集熒光信號實(shí)時(shí)監測每一個(gè)循環(huán)中擴增產(chǎn)物量的變化，最后通過(guò)標準曲線(xiàn)和CT值對待測樣品進(jìn)行定量分析。qPCR常用的有兩種方法：SYBR Green法和TaqMan探針?lè )ā?/div>
三、數字PCR
數字PCR即三代PCR，是對原始PCR的另一種改進(jìn)，是一種能夠實(shí)現核酸絕對定量的精準檢測技術(shù)，基于泊松分布原理將核酸樣品分配到大量獨立、平行的微反應單元（納升級）中，使每個(gè)反應室中平均只有一個(gè)拷貝或者沒(méi)有目標DNA分子，然后加入熒光信號進(jìn)行擴增，從而實(shí)現靶標核酸分子的絕對計數，提高檢測靈敏度和準確度。
四、逆轉錄PCR（Reverse T ranscription-PCR,RT-PCR）
逆轉錄PCR也叫反轉錄PCR，將RNA的反轉錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈式擴增相結合，是PCR的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中首先經(jīng)反轉錄酶將一條單鏈RNA逆轉錄成cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。作為模板的RNA可以是總RNA、mRNA或體外轉錄的RNA產(chǎn)物。無(wú)論使用何種RNA，關(guān)鍵是確保RNA中無(wú)RNA酶和基因組DNA的污染。RT-PCR技術(shù)靈敏且應用廣泛，可用于檢測細胞中基因表達水平，細胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。一般通過(guò)一步法或兩步法進(jìn)行，一步法是RT反應和PCR反應在同一試管中進(jìn)行；而在兩步法中兩個(gè)反應是分開(kāi)依次進(jìn)行的。
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