Millipore超濾離心管操作步驟

一、Millipore密理博超濾離心管0.5ml簡介

Millipore密理博超濾離心管0.5ml，即Amicon@Ultra-0.5超濾離心管，具有快速超濾功能，能夠達到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理，獲得較高的樣本回收率(通常>90%),并達到30倍的濃縮。根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同，典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計也降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢；過濾管的死體積設(shè)計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后，濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實現(xiàn)高效回收。Amicon@Ultra-0.5超濾管未經(jīng)消毒，僅供一次使用。

Amicon UItra-0.5產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標(biāo)稱分子量限值，NMWL)。這些超濾管僅供研究使用，不適用于診斷程序。

二、Millipore密理博超濾離心管0.5ml操作步驟

1. 預(yù)清洗

Amicon Ultra-0.5超濾管的超濾膜含有痕量甘油。如果擔(dān)心干擾后續(xù)分析，可用緩沖液或Milli-Q水進行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在，可用0.1 N NaOH清洗，再用緩沖液或Milli-Q水進行二次清洗。

注意：Amicon Ultra超濾離心管中的濾膜一旦潤濕后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用，則讓液體保留在濾膜上，直到使用。

2. 操作

（1）將Amicon Ultra-0.5超濾內(nèi)管插入所提供的一個微量離心管中。

（2）向Amicon Ultra內(nèi)管中加入不超過500 μL的樣本，并蓋上蓋子。

（3）將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中，讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中央；用一個類似的超濾管平衡。

（4）以14,000×g離心約10-30分鐘，具體時間取決于所使用超濾管的NMWL。

（5）離心結(jié)束后將整個超濾管從離心機中取出，取出內(nèi)管。

（6）為了回收濃縮后的溶質(zhì)，將內(nèi)管倒過來插在一個干凈的微量離心管中。放在離心機中，讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中央；用一個類似的超濾管進行平衡。以1,000×g離心2分鐘，使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。

說明：要達到理想的回收效果，請盡早進行倒置離心。