卵巢癌3D類(lèi)器官培養基

產(chǎn)品名稱(chēng)：卵巢癌3D類(lèi)器官培養基（Ovarian Carcinoma Organoid Medium）
產(chǎn)品說(shuō)明：卵巢癌3D類(lèi)器官培養基（Ovarian Carcinoma Organoid Medium）是一種為促進(jìn)人源卵巢癌類(lèi)器官體外形成和擴增而開(kāi)發(fā)的培養基。它是一種無(wú)菌的液體混合系統，含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無(wú)機化合物、激素、生長(cháng)因子、微量礦物質(zhì)等。該培養基的*配方可以提供一個(gè)理想人源卵巢癌類(lèi)器官體外培養環(huán)境，選擇性地促進(jìn)體外人源卵巢癌類(lèi)器官的生長(cháng)。

產(chǎn)品優(yōu)勢：
(1) 培養成功率高

(2) 體外持續擴增

(3) 保持腫瘤特征

(4) 藥敏結果與臨床數據接近

使用說(shuō)明：
?實(shí)驗前準備
（1）15mL無(wú)菌離心管、1.5mL離心管、24孔細胞培養板、移液器、移液管、無(wú)菌槍頭等表面消毒后放入生物安全柜中紫外照射30min。
（2）提前30min從4℃冰箱取出卵巢癌類(lèi)器官培養基平衡至室溫，提前1h從-20℃冰箱取出所需體積的基質(zhì)膠冰上融化。
?卵巢癌類(lèi)器官培養
（1）將獲取的卵巢癌原代細胞懸液計數，根據計算好的體積吸取細胞懸液加入預冷的1.5mL離心管中。
（2）補齊預冷的卵巢癌類(lèi)器官培養基至所需體積，將預冷后的細胞懸液加入等體積的基質(zhì)膠中輕輕混勻（全程冰上操作），使得卵巢癌原代細胞終濃度為5×106個(gè)細胞/毫升。
（3）然后將細胞與基質(zhì)膠的混合液按照50μL/孔呈半球形點(diǎn)膠于24孔板。
（4）將培養板放入5%CO2、37℃培養箱終至少30min，待基質(zhì)膠*凝固。沿孔壁每孔緩慢加入500μL預先恢復至室溫的類(lèi)器官培養基，置5%CO2、37℃培養箱培養。
（5）3天后鏡下觀(guān)察類(lèi)器官形成情況，粒徑大于30~50μm即認為類(lèi)器官已經(jīng)形成，每5天更換一次培養基進(jìn)行培養，持續觀(guān)察類(lèi)器官大小，鏡下觀(guān)察大部分類(lèi)器官大小均大于30~50μm目大小不再增大即可收集類(lèi)器官進(jìn)行后續實(shí)驗。
?卵巢癌類(lèi)器官收集
（1）棄培養基，每孔加入200μL基質(zhì)膠解離試劑，室溫放置1min。
（2）輕輕吹打混勻，收集至15mL離心管中，50rpm恒溫震蕩解離10-20min，解離之后1500rpm離心3 min，輕輕吸去上清，待用。
?卵巢癌類(lèi)器官傳代
（1）收集的類(lèi)器官，加入適量的消化酶，37℃，200rpm消化（具體時(shí)間根據類(lèi)器官大小和數量決定，以肉眼可見(jiàn)顆粒明顯減小一半為準，可中間取消化的類(lèi)器官顯微鏡觀(guān)察，類(lèi)器官消化至3~10個(gè)細胞集合體理想）。
（2）消化*后1500rpm離心3min，棄上清，使用清洗液重懸后1500rpm離心3min。
（3）加入預冷的卵巢癌類(lèi)器官培養基進(jìn)行重懸，計數，按照培養步驟操作繼續培養。
注意事項：
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.樣本需為腫瘤組織，且腫瘤細胞比例越高（>50%），類(lèi)器官培養成功率越高。3.使用產(chǎn)品時(shí)應注意無(wú)菌操作，避免污染。
4.類(lèi)器官培養過(guò)程要輕柔，避免基質(zhì)膠凝固后散膠。
5.為保持本產(chǎn)品的理想使用效果，不宜將其過(guò)夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。6.請于保質(zhì)期內使用本產(chǎn)品，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
7.本產(chǎn)品僅用于科研用途，不能用于體外診斷。