SIM SF 培養基

培養基特點(diǎn)：

SIM SF 培養基為澄清淡黃色透明液體，如果一旦發(fā)現培養基變得渾濁或出現沉淀，請勿使用。

保存條件：

2~8℃避光保存，一旦過(guò)期，請勿使用。

穩定性及保質(zhì)期：

室溫下一個(gè)星期內穩定。

自收到之日起， 2~8℃避光保存，六個(gè)月內穩定。

細胞凍存：

選擇處于對數生長(cháng)期的細胞，保證活率大于90%。

制備細胞凍存液：45%新鮮培養基，45%條件培養基，10%DMSO。

200g離心5分鐘，棄去上清。

用細胞凍存液重懸細胞，細胞凍存密度為1.2~2×107/ml/ml。

迅速轉移重懸的細胞至無(wú)菌的凍存管中，每管1~2ml。

將凍存管放入程序降溫盒中，-70℃冰箱放置過(guò)夜。

若凍存細胞需要長(cháng)期保存，將其轉移至液氮罐中。

細胞復蘇：

將凍存管迅速轉移至27℃水浴中，進(jìn)行融化。

將融化的細胞轉至無(wú)菌的含5-10ml新鮮培養基的無(wú)菌離心管中。

200g低速離心5分鐘，緩慢倒掉上部培養基，不要將沉降的細胞懸起。

用10-20ml新鮮培養基重懸細胞，確保重懸后的細胞密度大于1×106/ml左右。

將重懸的細胞放入無(wú)菌培養瓶中，旋蓋擰松，放在搖床中懸浮培養。

當細胞密度生長(cháng)達到2~4×106/ml時(shí)，可以進(jìn)行傳代，傳代時(shí)細胞接種密度為0.8-1×106/ml。