細胞培養基的滅菌及儲存方法有哪些？

不同的培養基由于其營(yíng)養成份不同，滅菌方式和儲存方法也可能不同。那么細胞培養基的滅菌及儲存方法有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、不同細胞培養基的除菌方式及注意事項

某些培養基（如MEM）可進(jìn)行高壓滅菌，這類(lèi)培養基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉，一般是在培養基高壓滅菌后才加入。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）代替L-谷氨酰胺?？筛邏簻缇呐囵B基在121℃、15 psi，15分鐘的條件下wan全可達到滅菌效果及營(yíng)養成分的最小損失，不需將滅菌時(shí)間延長(cháng)。

絕大多數細胞培養基不適宜高壓滅菌。因培養液中常含有維生素、蛋白質(zhì)、多肽、生長(cháng)因子等物質(zhì)，這些物質(zhì)在高溫或射線(xiàn)照射下易發(fā)生變性或失去功能，因而上述液體多采用過(guò)濾消毒以除去細菌?？晒┻^(guò)濾滅菌使用的濾膜很多，其材料多為polyethersulphone（PES）、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。膜過(guò)濾除菌是當前較為常用及便捷的一種方法，常采用0.2 μm孔徑的濾膜，部份采用0.1 μm孔徑。與高壓過(guò)濾方式相比，濾膜具有使用期限且價(jià)格較高，但對細胞培養基的營(yíng)養成份破壞性較小。

二、不同細胞培養基存儲過(guò)程中的注意事項

通常液體細胞培養基避免-20 ℃凍存，因為解凍時(shí)可能會(huì )有營(yíng)養成份析出，影響培養效果。正常情況下于2 ~ 8 ℃避光保存，使用前從冰箱取出，放入室溫進(jìn)行平衡。通常的液體培養基有效期是6個(gè)月到12個(gè)月。液體細胞培養基盡量避免長(cháng)期貯存，其中的谷氨酰胺會(huì )隨著(zhù)儲存時(shí)間的延長(cháng)而慢慢分解，如果細胞生長(cháng)不良，可考慮檢測培養基中的谷氨酰胺含量確定是否再補加谷氨酰胺。市售商業(yè)化液體細胞培養基有具體的有效期，對于使用干粉細胞培養基自行配制成液體以后，也應低溫（2 ~ 8 ℃）貯存。除培養基中如谷氨酰胺易降解之外，培養基中的其他成份隨著(zhù)溫度的升高也可能會(huì )發(fā)生降解或是析出。

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