Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項

Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒是一款靈敏度高且能快速簡(jiǎn)便地檢測細胞凋亡的產(chǎn)品。本試劑盒可通過(guò)流式細胞儀來(lái)進(jìn)行懸浮細胞、貼壁細胞的流式凋亡檢測。那么你知道Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、檢測原理

細胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì )激活一些特異性的DNA內切酶，這些內切酶會(huì )切斷核小體間的基因組DNA。使得凋亡細胞的DNA被切割成180~200bp片段，在瓊脂糖凝膠上通常以180~200bp 的階梯狀遷移。細胞經(jīng)過(guò)固定破膜后，TdT酶（脫氧核糖核酸末端轉移酶）將熒光標記的dUTP 連接到細胞斷裂DNA 暴露的 3'-OH 末端，通過(guò)流式細胞儀檢測 dUTP偶聯(lián)物發(fā)出的熒光信號，從而來(lái)檢測晚期凋亡。

二、保存條件

-20°C 保存，保質(zhì)期一年。Labeling Solution 需避光保存，Labeling Solution、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer需避免反復多次凍融，建議分裝保存。

三、注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究使用。

2. 請注意安全事項，遵守實(shí)驗室試劑操作規范操作。

3. 用于該試劑盒的檢測樣本zui低細胞數目不低于 5×105個(gè)。

4. 實(shí)驗中需要重懸細胞的步驟，用移液器輕輕吹打細胞 10~20次，吹打時(shí)請勿將槍頭中的液體wan全吹出，避免造成細胞損傷和產(chǎn)生過(guò)多的氣泡。

5. 離心去上清的操作要小心謹慎，避免造成細胞損失。

6. Labeling Solution和TdT Enzyme 應避免反復凍融和渦旋操作。

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