細胞因子，是一類(lèi)由免疫細胞和某些非免疫細胞（內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等）在受到刺激后合成和分泌的小分子蛋白質(zhì)，具有廣泛的生物學(xué)活性，通過(guò)結合相應受體，調控細胞生長(cháng)、分化、凋亡、傷口愈合、信號轉導和穩態(tài)平衡。研究細胞因子為臨床上疾病的預防、診斷、機理研究以及治療奠定了堅實(shí)基礎，其應用前景廣泛。那么你知道細胞因子檢測的常見(jiàn)免疫學(xué)技術(shù)有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！
一、傳統Western Blot
傳統蛋白質(zhì)免疫印跡法（Western Blot，WB）是一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)免疫分析技術(shù)，被應用于確認特定蛋白質(zhì)的存在并進(jìn)行定性和半定量分析。WB實(shí)驗基于抗原抗體特異性反應，經(jīng)過(guò)SDS-PAGE分離蛋白質(zhì)后，將其轉移到硝酸纖維素薄膜（NC）或聚偏二氟乙烯膜（PVDF）。隨后，使用脫脂牛奶封閉液進(jìn)行封閉，一抗稀釋液進(jìn)行孵育。蛋白質(zhì)與抗體結合后，通過(guò)洗滌去除未結合的一抗，接著(zhù)加入酶標記或者熒光標記的二抗。最后，利用化學(xué)發(fā)光液或者特定的激發(fā)光源，對靶蛋白進(jìn)行檢測，可以通過(guò)膠片、化學(xué)發(fā)光儀或熒光成像儀進(jìn)行成像，最終捕捉到蛋白條帶。
二、全自動(dòng)毛細管Digital Western
作為創(chuàng )新性毛細管電泳免疫學(xué)技術(shù)，全自動(dòng)毛細管Digital Western（也稱(chēng)Simple Western）將Western Blot技術(shù)和ELISA技術(shù)合二為一，具備傳統WB蛋白質(zhì)可視化定性?xún)?yōu)勢，同時(shí)具備ELISA免疫學(xué)實(shí)驗精準定量能力，其靈敏度和精密度符合高標準生物分析要求，可利用超微量樣本實(shí)現內源性蛋白質(zhì)精準定量。自動(dòng)化規避了傳統WB和SDS-PAGE勞動(dòng)密集型操作引入的人為誤差。僅需要微量樣本（3μL）即可實(shí)現多重蛋白質(zhì)表達檢測，節約珍貴樣品，
三、傳統ELISA
酶聯(lián)免疫吸附測定法是一種常用的免疫測定方法，通常用于定量檢測樣本中目的蛋白的水平。利用ELISA檢測的樣本包括血清、血漿、細胞培養上清液、細胞裂解物、唾液、組織裂解物和尿液。ELISA通常在96孔板中進(jìn)行，孔板中包被有一種捕獲特定分析物的抗體。在與實(shí)驗樣本、標準品或對照品孵育后，目標分析物將被這種抗體捕獲。隨后使用結合到目標分析物不同抗原表位的檢測抗體完成"夾心"結構。接著(zhù)加入底物溶液，產(chǎn)生的信號與結合的分析物量成比例。ELISA有不同形式，包括直接法ELISA、間接法ELISA、夾心法ELISA和競爭法ELISA。
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